BAZI RUMEN FUNGUSLARININ SAHİP OLDUĞU POTANSİYEL PROBİYOTİK ENZİM AKTİVİTESİ

Ruminant hayvanların et ve süt verimi üzerine etki eden çok sayıda faktör bulunmaktadır. Bu

faktörler arasında herbivor hayvanların sindirim kanalı sağlığı ve sindirim kanalında yaşayan

mikroorganizmaların etkinliği ön plana çıkmaktadır. Ruminant hayvanların sindirim

kanalında prokaryotik ve ökaryotik düzeyde çok sayıda fakültatif veya zorunlu anaerobik

solunum yapan geniş bir flora mevcuttur. Sindirim kanalı florası tarafından gerçekleştirlen

fermantasyon sonucu oluşan ürünler herbivor canlılar tarafından kullanılabilmektedir. Bundan

dolayı herbivorların sindirim kanalında mevcut olarak bulunan probiyotik kökenli

mikroorganizmaların etkinliği de oldukça önemlidir. Probiyotik mikroorganizmalar sahip

olduğu enzimatik özelliği ve sindirim kanalına tutunmaları sayesinde patojen mikroorganizma

etkinliğini inhibe edebilme özelliğine sahiptirler. Bağırsak epiteline tutunan probiyotik

mikroorganizmalar aynı zamanda herbivor canlının doğal savunma mekanizmasını

oluşturarak immün sitemi üzerinde pozitif bir etkiye sahiptirler. Biyokimyasal olarak sahip

oldukları enzimatik reaksiyon sonucu oluşturdukları son ürün aynı zamanda patojen

mikroorganizmalar için antogonist etkiye sahip olmaktadır. Probiyotik mikroorganizmalar

karbonhidratların katabolizmasında görevli olan glikozit hidrolaz enzim ailesinine üye EC

3.2.1.80 ekzoinülinaz ve EC 3.2.1.7 endoinülinaz enzimlerine sahiptir. Bu enzimler β-2,1

glikozit bağı ile oluşan fruktooligosakkaritlerin hidrolizde görev alır. Kısa zincirli fruktoz

monomerlerinden meydana gelen bu oligosakkaritler ve/veya inülin tipi fruktanlar inülinaz

enziminin aktivitesi için substrat olarak görev alırlar. Bu çalışmamızda probiyotik

mikroorganizmaların sahip olduğu inülinaz enzim aktivitesi dikkate alınarak ruminantların

sindirim kanalında doğal yayılışa sahip olan rumen funguslarından Neocallimastix sp. ile

Orpinomyces sp.’nin potansiyel inülinaz aktivitesi hesaplanarak kendi arasında kıyaslanması

yapılmıştır. İn vitro ortamda geliştirilen bu iki ökaryotik rumen fungusun potansiyel inülinaz

aktivitesi Miller yöntemine göre DNS metodu ile gerçekleştirilmiştir. Her iki fungus için

optimum pH ve sıcaklık düzenlemesi yapılmış ve 5 inci inkübasyon sürelerinde inülinaz

etkinliğinin diğer günlere oranla yüksek olduğu tespit edilmiştir. Elde edilen enzim aktivesine göre Neocallimastix sp.’nin süpernatant enzim etkinliğinin 14,03 μmol/dk/mg protein,

Orpinomyces sp.’nin ise 13,92 μmol/dk/mg protein olduğu tespit edilmiştir. Sonuç olarak

ruminant hayvanların beslenmesi sırasında inülin kökenli bir diyet ile bu mikroorganizmaların

sahip olduğu enzim aktivitesinin artırılabileceği ya da süpernatant olarak hücre dışına

segrasyona uğramış enzimlerin kısmi saflaştırılması gerçekleştirilerek takviye gıda olarak

verilebilmesi düşünülmüştür.