Determination of solifenacin succinate in human plasma and pharmaceutical formulations using HPLC-UV

Amaç: Bu çalışmada, tamsulosin, silodosin ve solifenasin süksinatın tekli ve

eşzamanlı olarak farklı ortamlarda miktar tayini için yeni analitik yöntemlerin

geliştirilmesi ve ayrıca tamsulosin, silodosin ve solifenasin süksinatın oral

yoldan kronik olarak uygulandığı ratların metabolom profillerinin çıkarılması

amaçlandı. <o:p></o:p>

Materyal ve Metot: %1.0 TFA çözeltisi ile

hazırlanan her üç etkin madde çözeltileri UV-Görünür Bölge, 1D-Türev ve 2D-Türev Spektroskopi yöntemleriyle

spektrumları alındı ve absorbansları okundu. HPLC yönteminde ise hareketli

fazla hazırlanan numuneler 10.0

mM amonyum format tamponu (pH: 4): asetonitril: metanolden (55:32.5:12.5 h/h/h)

oluşan hareketli faz, C18 kolon, 30 ° C, 1 mL/dk akış hızı ve 210 nm dalga boyu

kullanılarak analiz edildi. Geliştirilen dört yöntemin geçerlilik testleri yapıldı ve yöntemler ticari

farmasötik preparatlara uygulandı. Ayrıca üç maddenin plazmadan ekstraksiyonu

için yeni bir prosedür geliştirildi. Metabolomiks çalışmasında, alınan rat plazma örneklerinden elde

edilen ekstraktlar hareketli faz içerisinde çözüldükten sonra LC/QTOF-MS cihazı

ile pozitif iyon modunda analiz edildi. Analiz sonuçları çoklu değişkenli veri

analiz yöntemleri kullanılarak değerlendirildi.<o:p></o:p>

Bulgular: Geliştirdiğimiz yöntemler üç etken maddenin gerçek numunelere

uygulandığında %93.2-103.2 arasında geri kazanım elde edildi. Yöntemlerin

güniçi ve günler arası kesinlik ve doğruluk değerleri %8’den düşük bulundu.

Plazma katım yapılan etken maddelerin önerilen ekstraksiyon prosedürüyle geri

kazanımı silodosin, tamsulosin ve solifenasin için sırası ile %92.9-99.4,

93.9-100.4 ve 93.1-98.1’dir. LC/QTOF-MS

ile analiz edilen üç ilacın uygulandığı grupların sonuçları kontrol grupları

karşılaştırıldı ve istatistiksel olarak silodosin, tamsulosin ve solifenasin

süksinat grupları için sırasıyla anlamlı 41, 35 ve 43 tane metabolit tespit

edilip tanımlandı ve metabolitlerin ilişkili olduğu yolaklar analiz edildiğinde

gliserofosfolipid, araşidonik asit, sfingolipid, glutamat, retinol, tiamin

metabolizması ve aminoaçil-tRNA biyosenteziyle anlamlı derecede ilişkili olduğu

görüldü.<o:p></o:p>

Sonuç: Geliştirilip geçerlilik testleri

yapılan yöntemlerle üç etken maddenin piyasada mevcut farmasötik preparatlarda

ve katım yapılan plazmada miktar tayinleri yapıldı. Çalışma sonucunda, analitik

yöntemlerin kalite kontrol çalışmalarında ve önerilen ekstraksiyon prosedürünün

ise klinik çalışmalarında başarıyla uygulanabileceği sonucuna varıldı. Metabolomiks

çalışmasında her madde için tanımlanan metabolitlerin ve rat metabolizmasında gliserofosfolipid, araşidonik asit,

sfingolipid, glutamat, retinol, tiamin metabolizması ve aminoaçil-tRNA

biyosentezinde meydana gelen değişiklikler ileri dönemde yapılacak

araştırmalara yol göstereceği kanaatindeyiz. <o:p></o:p>

Anahtar Kelimeler: Metabolomiks,

silodosin, solifenasin süksinat, tamsulosin, LC/QTOF-MS, validasyon.