Lactobacillus coryniformis BAKTERİSİNDEN İZOLE EDİLEN KİTİNAZ ENZİMİNİN ÇİNKOOKSİT (ZNO) NANOPARTİKÜLLERİNE İMMOBİLİZASYONU VE DEPO ZARARLISI MISIR BİTİ (SİTOPHİLUS ZEAMAİS)NİN GELİŞİMİ ÜZERİNE ETKİSİNİN ARAŞTIRILMASI

Son yıllarda biyoteknoloji

ve nanoteknoloji alanlarında yaşanan hızlı gelişmeler sonucu keşfedilen

yöntemlerin bazıları, tarım sektöründe çeşitli alanlarda sıklıkla

kullanılmaktadır. Bunlar, geleneksel yöntemlerle kıyaslandığında birçok üstün

özelliklerinden dolayı araştırmacıların ilgi odağı haline gelmiştir. Bu

yöntemlerden yararlanılarak ülkemizde yoğun olarak yetiştiriciliği yapılan

tohumluk mısırın depo şartlarında zararlılar tarafından uğradığı verim ve

kalite düşüklüğünü biyoteknolojik bir yaklaşımla oluşturulan biyolojik bir

ürünle en aza indirilmesi planlanmaktadır. Bu kapsamda depo zararlısı olarak

bilinen mısır biti Sitophilus zeamais

Motschulsky gelişiminin, oluşturulacak olan nano formülasyon ile kontrol altına

alınması amaçlanmaktadır.<o:p></o:p>

Projemizin ön çalışma

denemelerinde; peynirden

izole edilen Lactobacillus

coryniformis’den kitinaz enzimi kısmi olarak saflaştırılmıştır. İkinci

aşamada Çinkooksit (ZnO) nanopartiküllerine immobilizasyonu yapılmıştır. Daha

sonra mısır depo zararlısı olan Sitophilus

zeamais üzerine 0, 2, 4, 6, 10 mg/l olarak oluşturulan bu formülasyon

uygulanmış ve sonuçlar projede ön çalışma olarak sunulmuştur.<o:p></o:p>

Proje çalışmamızın ilk

safhasında, Lactobacillus

coryniformis’den kitinaz enziminin aktivitesi spektrofotometrik yöntemle incelenecektir.İkinci

aşamada, bakteriden elde edilen kitinaz enzimi Yüksek Performanslı Sıvı

Kromotografisi (HPLC) Fraksiyon kollektörü kolon yöntemi ile

saflaştırılacaktır. Üçüncü aşamada ise çinkooksit (ZnO) nanopartiküllerine

kitinazın immobilizasyonu yapılarak Nano formülasyon oluşturulacaktır.

Oluşturulan formülasyonun optimizasyonu için pH, başlangıç derişimi ve

sıcaklığın etkileri incelenecektir. Yapılan immobilizasyonun stabilitesini

kontrol etmek amacıyla, FTIR (Fourier Transform Infrared Spektrofotometre), SEM

(Taramalı Elektron Mikroskobu), AFM (Atomik Kuvvet Mikroskobu) Ölçümleri ve EDX

(Enerji Dağılımlı X-ışını) Analizi yapılacaktır.<o:p></o:p>

Tüm bu işlemlerin sonunda dördüncü aşamada, beş farklı Nano-İnsektisit

dozu oluşturularak (0, 2, 4, 6, 10 mg/l), yirmibeş ergin beş nano formülasyon

dozu ve dört tekrarlı olacak şekilde mısır tanelerine spreyleme yöntemi ile

uygulanarak böceğin beslenirken vücuduna alması sağlanacaktır. Beşinci aşamada,

böcek bağırsak dokuları mikrotom cihazı ile kesilerek enzim analizleri için

çıkarılacaktır. Altıncı aşamada, böceklerin bağırsaklarından örnek alınarak

alkalin fosfataz, adenozin trifosfataz, laktat dehidrojenaz aktivitelerinin

belirlenmesi için analize tabi tutulacak, kontrollere göre kıyaslama

yapılacaktır.<o:p></o:p>

Bu formülasyonda temel kuramımız, sosyo ekonomik olarak fayda sağlamaya

yöneliktir. Bu amaçla, piyasada yüksek oranlarda kullanılan kimyasal

insektisitlerle (malation vb.) yarışabilir (ucuz, hızlı nüfus edebilir vs.) bir

ürün elde ederek ülke ekonomisine direkt ve indirekt olarak katkı sağlayarak

bilim insanlarına yol gösterecek ve konuyla ilgili yayınlar yapılarak literatür

çalışmalarına destek verilecektir.<o:p></o:p>