Sığır Spermasının Uzun Süreli Saklanmasında Probiyotik Bakteri İlavesinin Spermatolojik Parametrelere Etkisinin Belirlenmesi

Sperma sulandırıcılarına patojen mikroorganizmalara karşı

çeşitli antibiyotik maddeler eklenmektedir. Ancak eklenen bu antibiyotikler

spermatozoonlar üzerinde yan etki gösterebilmekte ve bu işlemden sonra sperma

kalitesinde bir düşüş gözlemlenebilmektedir. Bu yüzden planlanan çalışmada,

boğa sperma sulandırıcısına probiyotik grubunda yer alan Lactobacillus

rhamnosus (LR), Lactobacillus acidophilus (LA) ve Bifidobacterium longum (BL)

eklenerek spermanın dondurulma çözdürülme sonrası kalitesi üzerine etkisinin

belirlenmesi amaçlanmaktadır. Bu maksatla Atatürk Üniversitesi Gıda ve

Hayvancılık Uygulama ve Araştırma Merkezi'nde bulunan 4 adet erkek boğadan

sperma alınacaktır. Alınan sperma ilk önce motilite yönünden kontrol edilecek,

sperma kalitesi uygun olan ejekülatlar pooling yapılmadan ayrı ayrı

değerlendirilerek spermanın sulandırılması ve dondurulması işleminde

kullanılacaktır. Çalışmada gruplar şöyle dizayn edilecektir: kontrol grubu,

antibiyotiksiz kontrol grubu, LR grubu, LA grubu ve BL grubu. Kontrol grubunda

antibiyotik kullanılacak, antibiyotiksiz kontrol grubu oluşturulacak,

probiyotik gruplarına antibiyotik kullanılmayacaktır. Sulandırma işlemi ve

gruplara göre probiyotik ilavesini

takiben sperma numuneleri 0.25 ml’lik payetlere çekilerek yaklaşık 3

saat +5oC’ta ekilibrasyona bırakılacak ve ekilibrasyonu izleyen

süreçte sıvı azot buharında (~-100oC), 10 dakika dondurularak -196oC’taki

sıvı azotta saklanacaktır. En az bir hafta sıvı azotta bekletilen dondurulmuş

sperma örnekleri 37 oC’de 25 sn süre ile çözdürülerek analizler

yapılacaktır. Çözdürülen spermada CASA parametreleri ile spermanın kalitesi

değerlendirilecektir. Floresan boyalar ile DNA hasarı, akrozomal bütünlük,

mitokondriyel membran potansiyeli tespit edilecek olup oksidatif stres parametreleri,

miRNA ekspresyon düzeyleri, TRPM3, Star, TGF-β ve Caspase-3 anlamında analiz yapılacaktır. Elde edilen

veriler SPSS (IBM SPSS Statistics, 26 V) programı ile analiz edilecektir.

Projeden istenilen sonuçların alınmasıyla sperma sulandırıcılarına eklenen

antibiyotiklerden kaynaklı zararlı etkinin önüne geçilerek probiyotik özellik

gösteren bakterilerin kullanımı ile ilgili tartışma süreci başlayacaktır.<o:p></o:p>